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T4DNA连接酶在T4噬菌体中的作用

额,同学,是这样的 T4噬菌体它在入侵细菌(等其他细胞)的过程中,噬菌体自身的遗传物质(DNA)会被其他(特别是部分原核生物)的限制性核酸内切酶切掉而发生(DNA)变性 而T4连接酶就是为了修复DNA用的 把DNA再连接起来 恢复活性 总的来说,T4连接酶就是修复被宿主细胞的限制性核酸内切酶切断的DNA的 若我讲得不明白可以再问的..表达能力不好.. 还有不是只有遗传物质进入宿主的,确切说是除了蛋白质外壳之外的东西(所有内部物质)都会进入宿主细胞内.(注意!只有外壳会留在外面)里面的包括(遗传物质和酶)都会进入细胞 ,,,,酶对遗传物质具有保护作用

DNA连接酶是一种在DNA复制、修复和重组过程中发挥作用的、催化两脱氧核糖间以磷酸二酯键接合的酶.DNA连接酶主要用于基因工程,将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合,故也称“基因针线”. T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低. 噬菌体T4DNA连接酶分子是一条多肽链,分子量为60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制.此酶的催化过程需要ATP辅助.T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端.

T4 DNA Ligase即T4 DNA连接酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5'-P末端和3'-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子.同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks).

T4DNA连接酶作用机制:分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应.T4 DNA 连接酶是一单链多肽,分子量为68,000道尔顿,它能催化双链DNA上相邻的3羟基和5磷酸末断形成磷酸二脂键.λDNA

T4DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键.可接双链DNA的平末端、相容粘末端及其中的单链切口

因为t4dna进入受体后会与宿主dna结合,因此需要连接酶连接断口

可接双链DNA的平末端、相容黏末端及其中的单链切口,在分子生物学中有广泛的应用

常用的DNA连接酶有两种:来自大肠杆菌的DNA连接酶和来自噬菌体的T4DNA连接酶.二者的作用机理类似.T4连接酶作用分三步:(1) T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶-AMP复合物.(2) 酶-AMP复合物结合到具有5'-磷酸基和3'-羟基切口的DNA上,使DNA腺苷化.(3) 产生一个新的磷酸二酯键,把切口封起来.

DNA连接酶作用于很多的过程. 比如,DNA复制时连接冈崎片段拼接时产生的片段(真核生物中) 在基因工程中用来连接具有粘性末端的两个DNA片段 还有很多.总之它的作用就是将3'-OH末端和5'-P末端通过磷酸二酯键的形式连接起来.

e.colidna连接酶和t4连接酶的区别:ecolidna连接酶是从大肠杆菌中获得的dna 连接酶 只能连接粘性末端,而平末端则要交给t4dna连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端. 连接酶通常是包括“连接酶”这个字,就如dna连接酶是将脱氧核糖核酸(dna)片段连接.其他普遍的名称包括“合成酶”,因为这些酶是用作合成新的分子,或当它们是将二氧化碳加入一个分子时则称为“羧化酶”.

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